目的观察慢性吗啡耐受大鼠脊髓神经元兴奋性氨基酸转运体3（EAAT3）表达的变化。方法成年雄性SD大鼠45只,随机分为5组（n=9）,除假手术组（S组）外,生理盐水组（NS组）、吗啡组（M组）、氯胺酮组（K组）和吗啡+氯胺酮组（M+K组）均进行鞘内置管,鞘内置管后3 d进行鞘内给药,NS组鞘内注射生理盐水40μl,M组给予吗啡20μg,K组给予氯胺酮30μg,M+K组给予吗啡20μg+氯胺酮30μg,2次/d,连续7 d。分别在给药前、给药1、3、5、7 d及停药后1 d时测定50%缩爪阈值（PWT）与辐射热缩爪潜伏期（PWL）,最后一次测定痛阈后处死大鼠,分别采用免疫印迹分析和免疫组化法检测脊髓EAAT3的表达水平。结果与S组比较,M组给药1、3 d时PWT升高,给药7 d及停药后1 d时PWT降低,给药1、3、5 d时PWL延长,停药后1 d时PWL缩短;M+K组给药1、3、5、7 d及停药后1 d时PWT升高,PWL延长,M组和M+K组脊髓EAAT3表达下调（P(0.05）;与M组比较,M+K组给药3、5、7 d及停药后1 d时PWT升高,给药5、7 d时及停药后1 d时PWL延长,脊髓EAAT3表达上调（P(0.05）。EAAT3主要分布于脊髓背角Ⅰ-Ⅱ层的感觉神经元。结论脊髓背角神经元EAAT3表达下调参与了大鼠慢性吗啡耐受的形成,吗啡下调EAAT3表达的部分机制与激活N-甲基-D天冬氨酸受体有关。