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携带磷脂酰肌醇激酶-3 beta基因小干涉RNA的35型腺病毒载体的构建

Construction of the recombinant adenovirus' s containing fibers derived from B group serotype 35 vector with phosphatidylinositol kinase-3 catalytic beta polypeptide-siRNA

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1] 武汉市商业职工医院麻醉科 [2] 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科 [3] 武汉市普爱医院疼痛科
出处:
ISSN:

关键词: 磷脂酰肌醇激酶-3 小干涉RNA 腺病毒科 遗传载体

摘要:
目的构建磷脂酰肌醇激酶-3 beta(PI3Kcb)基因小干涉RNA(siRNA)的重组35型腺病毒载体(Ad5/F35)。方法在PI3Kcb mRNA序列中选择1个特异性靶序列,体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体pDC316-EGFP-U6,获得重组质粒pDC316-P13KcbsiRNA-EGFP。骨架质粒pBHG-fiber5/35和穿梭质粒pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP共转染293细胞,同源重组产生Ad5/F35-PI3Kcb-siRNA。经聚合酶链反应(PCR)鉴定目的基因的表达。结果 PCR表明Ad5/F35-PI3Kcb-siRNA质粒构建正确。结论获得的Ad5/F35-PI3Kcb-siRNA可以用于转基因疼痛治疗的实验研究。

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第一作者:
第一作者单位: [1] 武汉市商业职工医院麻醉科
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