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人IGF1R启动子克隆及荧光素酶报告基因载体构建

Cloning of Human IGF1R Promoter and Construction of the Promoter Luciferase Reporter Gene Vectors

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,肿瘤生物中心,湖北省肿瘤侵袭转移重点实验室,武汉市,430030
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关键词: IGF1R 启动子 荧光素酶报告基因 载体构建

摘要:
目的 克隆人IGF1R基因启动子序列,构建IGF1R基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 运用PCR方法从HeLa细胞基因组DNA中获得目的 基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建IGF1R基因启动子报告基因载体;将重组质粒转染至HeLa细胞48 h后,采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性.结果 PCR扩增出800 bp左右IGF1R基因启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染HeLa细胞后经双荧光素酶报告基因检测确定重组体有启动子活性.结论 成功构建了IGF1R启动子报告基因载体,在细胞系中进行初步的活性分析得知所克隆的IGF1R基因调控序列内包含启动子活性区域.

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,肿瘤生物中心,湖北省肿瘤侵袭转移重点实验室,武汉市,430030
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