摘要:
目的 利用基因工程技术合成sTRAIL(水溶性TRAIL)基因,并以AcGFP为报告基因,构建针对sTRAIL基因的pIRES2-AcGFPl-sTRAIL重组质粒.方法 从人胎盘组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增sTRAIL,并加入XhoI和BamHI酶切位点,通过双酶切将其连接于表达载体pIRES2-AcGFPl,通过PCR、酶切及测序鉴定重组质粒构建的正确性,最后用pIRES2-AcGFP1-sTRAIL重组质粒转染Hela细胞利用倒置荧光显微镜直接观察表达情况.结果 酶切、PCR及测序结果证实pIRES2-AcGFP1-sTRAIL构建序列正确.结论 利用基因工程技术成功构建真核表达载体pIRES2-AcGFP1-sTRAIL,为后续抗肿瘤研究奠定了基础.