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pIRES2-AcGFP1-sTRAIL真核表达载体的构建及鉴定

Construction and identification of plRES2-AcGFPI-sTRAIL prokaryotic expression vector

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]同济大学附属同济医院妇产科,上海,200065
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关键词: TRAIL基因 真核表达载体 载体构建

摘要:
目的 利用基因工程技术合成sTRAIL(水溶性TRAIL)基因,并以AcGFP为报告基因,构建针对sTRAIL基因的pIRES2-AcGFPl-sTRAIL重组质粒.方法 从人胎盘组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增sTRAIL,并加入XhoI和BamHI酶切位点,通过双酶切将其连接于表达载体pIRES2-AcGFPl,通过PCR、酶切及测序鉴定重组质粒构建的正确性,最后用pIRES2-AcGFP1-sTRAIL重组质粒转染Hela细胞利用倒置荧光显微镜直接观察表达情况.结果 酶切、PCR及测序结果证实pIRES2-AcGFP1-sTRAIL构建序列正确.结论 利用基因工程技术成功构建真核表达载体pIRES2-AcGFP1-sTRAIL,为后续抗肿瘤研究奠定了基础.

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第一作者:
第一作者单位: [1]同济大学附属同济医院妇产科,上海,200065
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