摘要：
目的 观察表皮细胞生长因子样结构域3(EGFL3)基因敲减对SNU-449人肝癌细胞生长增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,探索EGFL3发挥作用的分子机制.方法 利用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建EGFL3基因敲减的SNU-49细胞系,并利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测EGFL3基因干扰效率,选出敲减效率最高的一组作为基因敲减组(KD组),同时设阴性对照组(NC组),随后进行噻唑蓝(MTT)实验、细胞克隆形成实验、细胞凋亡实验、Transwell实验以及Transwell小室侵袭实验,以对比两组SNU-49细胞系的生长、增殖、凋亡、侵袭和转移的能力,最后通过RT-qPCR技术检测两组SNU-449细胞系中转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD基因的相对表达水平.组间样本比较采用独立样本t检验.结果 相较于NC组,KD组SNU-449细胞系中EGFL3基因的敲减效率为75.7％(t=13.730,P＜0.01),KD组SUN-49细胞的生长速度和细胞克隆数量明显低于 NC 组[5.29±0.23 比 6.30±0.26,t=6.606,P＜0.01;(1±1)个比(19±2)个,t=14.690,P＜0.01],KD 组细胞凋亡率明显高于 NC 组[(11.06±0.29)％比(3.20±0.13)％,t=-43.280,P＜0.01],KD组转移及侵袭的细胞数均明显低于NC组[(104±6)个比(178±3)个,t=20.090,P＜0.01;(209.00±0.00)个比(306.00±3.51)个,t=48.170,P＜0.01].RT-qPCR 检测结果显示,KD组SNU-449细胞系中的TGF-β1、SMAD2、SMAD3和SMAD4基因的相对表达量高于NC 组(t=3.759、5.464、5.979、8.956,P＜0.05),SMAD7 基因的相对表达量则低于 NC 组(t=0.368,P＞0.05).结论 EGFL3基因可促进SNU-449肝癌细胞系的生长、增殖、侵袭、转移并抑制凋亡,其机制可能与抑制TGF-β1/SMAD信号通路有关.
