摘要:
目的观察富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因3(LRIG3)在3种肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721中的表达,探讨LRIG3基因对肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721的细胞周期、侵袭能力和凋亡的影响。方法将过表达的LRIG3质粒和空白质粒经脂质体法分别转染肝癌细胞株HepG-2、LM3和7721中,相对应分为实验组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测LRIG3表达水平变化,采用流式细胞仪、Transwell法及原位末端转移酶标记(TUNEL)等方法对细胞株的生物学行为进行分析。结果与对照组比较,实验组HepG-2、LM3和7721细胞中LRIG3 mRNA水平分别上升78.9%、67.8%和59.6%,蛋白表达水平分别升高91.2%、79.9%和65.7%,差异有统计学意义(P(0.05);实验组HepG-2和LM3细胞中穿出细胞数量均明显少于对照组,差异有统计学意义(P(0.05);TUNEL染色结果显示对照组HepG-2细胞凋亡率为23.4%,实验组为35.7%。对照组LM3细胞凋亡率为21.6%,实验组为39.5%。对照组7721细胞凋亡率为20.2%,实验组为30.5%,对照组与实验组间凋亡率差异有统计学意义(P(0.05)。实验组HepG-2和LM3细胞中S期与G2/M期细胞数之和低于对照组,差异有统计学意义(P(0.05),但7721细胞与对照组比较差异无统计学意义(P)0.05)。结论 LRIG3基因过表达能阻断细胞周期于S期和G2/M期,降低肝癌细胞的侵袭能力,加速细胞凋亡。