摘要：
目的 探讨中性粒细胞分泌的组织蛋白酶C对乳腺癌侵袭、转移的影响.方法 将MDA-MB-231乳腺癌细胞与中性粒细胞上清液共培养,以组织蛋白酶C抑制剂(AZD7986)处理共培养细胞24 h,Transwell法检测3组细胞(MDA-MB-231细胞组、共培养组、共培养+AZD7986组)侵袭、迁移能力的变化.蛋白质印迹法(Western blot)检测3组细胞中CTSC、上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达变化.将MDA-MB-231乳腺癌细胞经肠系膜上静脉注射入BALB/c雌性小鼠体内,随机分为两组,分别给予口服磷酸盐缓冲液(PBS,100μl)(对照组)或AZD7986(5 mg/kg)(实验组),4周后观察小鼠肝脏成瘤情况.3组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验.结果 MDA-MB-231细胞组、共培养组、共培养+AZD7986组侵袭细胞数[(67.67±2.52)、(79.67± 4.04)、(56.33±3.21)个,F(2.6)=37.131,P＜0.01]差异有统计学意义,MDA-MB-231细胞组、共培养组、共培养+AZD7986 组迁移细胞数[(98.33±3.79)、(107.00±4.58)、(82.33±4.04)个,F(2.6)=27.277,P＜0.01]差异有统计学意义.共培养+AZD7986组、共培养组、MDA-MB-231细胞组CTSC蛋白水平(0.53±0.03、1.05±0.08、0.75±0.06,F(2,6)=49.600,P＜0.01)差异有统计学意义,共培养+AZD7986组E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白水平高于共培养组(1.05±0.05比0.58±0.06,t=16.060,P＜0.01),高于 MDA-MB-231 细胞组(1.05±0.05 比 0.94±0.08,t=4.882,P＜0.05),N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白水平低于共培养组(0.58±0.07比0.83±0.03,t=8.503,P＜0.01),低于MDA-MB-231 细胞组(0.58±0.07 比 0.77±0.05,t=6.391,P＜0.01),波形蛋白(Vimentin)蛋白水平低于共培养组(0.52±0.08 比 0.75±0.05,t=7.866,P＜0.01),低于 MDA-MB-231 细胞组(0.52±0.08 比 0.67±0.03,t=5.173,P＜0.01),Snail 蛋白水平低于共培养组(0.66±0.05 比0.83±0.05,t=5.997,P＜0.01),低于 MDA-MB-231 细胞组(0.66±0.05 比 0.77±0.02,t=4.711,P＜0.05),ZEB 蛋白水平低于共培养组(0.30±0.02 比 0.81±0.02,t=17.390,P＜0.01),低于MDA-MB-231 细胞组(0.30±0.02 比 0.82±0.02,t=17.692,P＜0.01).在体内实验中,AZD7986组小鼠肝脏肿瘤体积低于对照组[(1.98 × 106±1.90 × 105)比(6.49 × 106±3.41 × 105),t=37.080,P＜0.01].结论 通过抑制组织蛋白酶C的表达,MDA-MB-231乳腺癌细胞的侵袭迁移能力明显下降,小鼠肝脏肿瘤体积明显减小.
