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Twist沉默介导的间充质-上皮转化对乳腺癌干细胞特性的影响

Silencing Twist gene leads to mesenchymal-to-epithelial transition and loss of stemlike properties in breast cancer

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资源类型:

收录情况: ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E ◇ 中华系列

单位: [1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院甲乳外科 [2] 华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科
出处:
ISSN:

关键词: 乳腺癌 Twist 小干扰RNA 间充质-上皮转化 肿瘤干细胞

摘要:
目的观察Twist沉默介导的间充质-上皮转化(MET)对乳腺癌干细胞特性的影响。方法小干扰RNA(siRNA)转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测细胞中Twist及MET相关分子[Slug、Snail以及波形蛋白(Vimentin)]的mRNA和蛋白的表达;显微镜观察Twist沉默后细胞的形态变化;流式细胞仪检测CD44+CD24-细胞比例;体外球体形成实验检测细胞自我更新能力;体内有限稀释实验检测细胞启动肿瘤能力。结果 si-Twist组与对照组比较,Twist基因的mRNA(0.24±0.04,P(0.01)和蛋白表达量明显降低;细胞表现为上皮样形态,排列规则、细胞间连接紧密、成团生长;间质相关分子Slug、Snail、Vimentin mRNA(0.25±0.05,P(0.01;0.34±0.03,P(0.01;0.44±0.04,P(0.01)和蛋白表达量明显降低;上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA(58.71±1.27,P(0.01)和蛋白表达量明显升高;肿瘤干细胞的百分比明显降低[(63.30±0.80)%比(86.50±0.70)%,P(0.01];球体形成能力明显降低[(46.67±2.52)个比(109.67±2.52)个,P(0.01];肿瘤起始细胞数目明显减少(1/122 851比1/20064,P(0.01)。结论 MDA-MB-231细胞中Twist沉默后,细胞发生MET,体外自我更新和体内成瘤能力下降。

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第一作者:
第一作者单位: [1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院甲乳外科
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