目的观察乳腺癌相关成纤维细胞（TAFs）在乳腺癌分化细胞去分化为肿瘤干细胞（CSCs）中的作用。方法用流式细胞仪从8例原代乳腺癌组织中分离TAFs并用免疫荧光鉴定;采用成球实验研究TAFs对乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力的影响,并检测TAFs处理前后干细胞表型CD44+CD24-/low的比例变化,观察TAFs对去分化的影响。结果从新鲜乳腺癌组织中分离出TAFs,间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色呈阳性。TAFs与乳腺癌腺上皮细胞（BCCs）共接种能增强其自我更新能力,共接种组和对照组的成球数分别为（71.67±3.51）和（24.67±1.53）个（P(0.01）。TAFs的条件培养基（CM）能增强乳腺癌腺上皮细胞自我更新能力,CM处理组和对照组的成球数分别为（74.67±3.06）和（30.33±3.21）个（P(0.01）。TAFs能增强乳腺癌分化细胞的自我更新能力,分化细胞(non-CD44+CD24-/low)经CM处理后的成球数为（86.00±3.00）个,而对照组为（15.33±1.53）个（P(0.01）;TAFs能促进乳腺癌分化细胞的去分化,non-CD44+CD24-/low细胞经CM处理后,CD44+CD24-/low比例明显上升达（52.13±0.70）%,对照组为（17.07±0.65）%（P(0.01）。结论 TAFs能通过旁分泌的方式增强乳腺癌腺上皮细胞的自我更新能力,并促进分化细胞去分化为肿瘤干细胞。