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携带DREAM基因小分子干扰RNA重组质粒的构建

Construction of recombinant DREAM-targeting small interfering RNA expressing plasmids

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ CSCD-E

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科,湖北省武汉市430030 [2]广州中医药大学附属第二医院麻醉科,广东省广州市510120
出处:
ISSN:

关键词: 转录因子 DREAM 重组质粒 RNA干扰 组织工程

摘要:
背景:DREAM是一种多功能蛋白,在细胞中不同位置与不同靶蛋白结合,体外细胞培养和动物实验均证明DREAM参与了许多疾病的发病机制.目的:构建携带DREAM基因的小分子干扰RNA重组质粒.方法:设计并合成shRNA对应的两条互补的寡核苷酸链,pDC316-EGFP-U6质粒经BamHⅠ和HindⅢ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,转化感受态E.coli DH5α,获得阳性克隆进行PCR和测序鉴定.结果与结论:经PCR、酶切及测序证实,重组质粒pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6片段大小为473 bp,其中插入的片断序列和位点与预期完全一致,说明pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6重组质粒构建成功.

语种:
第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科,湖北省武汉市430030
通讯作者:
通讯机构: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科,湖北省武汉市430030 [*1]华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科,湖北省武汉市430030
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资源点击量:426 今日访问量:0 总访问量:408 更新日期:2025-04-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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