目的：基于网络药理学和分子对接法探讨五苓散治疗肾结石的潜在分子机制。方法：利用中药系统药理学数据库和4个疾病基因数据库获取五苓散-肾结石共同靶点，利用Cytoscape version 3.8.0构建复合靶网络，GO和KEGG富集分析和蛋白质相互作用（PPI）网络分析发现其潜在分子机制。通过分子对接，观察有效分子与目标蛋白之间的相互作用模式。结果：通过分析五苓散药物相关靶点与肾结石靶点信息，取交集并绘制韦恩图，得到五苓散-肾结石共同靶点13个。构建了一个包含20个节点和19条关联线路的化合物靶基因相互作用网络，β-谷甾醇被认为是最有价值的化合物。通过PPI网络显示靶基因编码的蛋白具有复杂的相互作用，GO和KEGG提示五苓散可通过调控G蛋白偶联受体信号通路、钙信号通路和其他因素调控的钙重吸收而发挥作用。通过对最靶向的基因CHRM3进行分子对接，β-谷甾醇可进入CHRM3的活性口袋，对肾结石发挥潜在治疗作用。结论：G蛋白偶联受体信号通路、钙信号通路和其他因素调控的钙重吸收可能是五苓散治疗肾结石的潜在分子机制。β-谷甾醇可能是一种很有前途的治疗肾结石药物。