目的 建立液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的浓度.方法 用蛋白沉淀法处理血浆,分别以磺胺甲噁唑-d4和甲氧苄啶-d3为内标,色谱柱:ACE Excel 5 C18-PFP(2.1 mm×50 mm,5μm),柱温:40℃,流动相:乙腈(B)-3 mmol·L-1乙酸铵水溶液(含0.1％甲酸,A),梯度洗脱,流速:0.50 mL·min-1,进样量:5.00μL.用电喷雾电离子化源,正离子方式、多反应监测(MRM)扫描进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 254.10→m/z 156.00(磺胺甲噁唑),m/z 258.10→m/z 160.00(内标磺胺甲噁唑-d4),m/z 291.00→m/z 230.00(甲氧苄啶),m/z 294.00→m/z 230.00(内标甲氧苄啶-d3).考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度和回收率、基质效应及稳定性.结果 血浆样品中磺胺甲噁唑的回归方程为Y=2.41×10-4 X+1.42×10-3(R2=0.9986),磺胺甲噁唑在100～4×104ng·mL-1线性关系良好,定量下限为100.00 ng·mL-1;甲氧苄啶的回归方程为Y=2.53×10-3 X+8.59×10-4(R2=0.9994),甲氧苄啶在4.00～1.6×103ng·mL-1线性关系良好,定量下限为4.00 ng·mL-1.磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的日内日间精密度均小于15％.低、中、高3种浓度磺胺甲噁唑质样本内标化归一的基质效应分别为(96.80±1.80)％,(99.60±0.70)％,(100.00±0.90)％;平均回收率>95.00％;甲氧苄啶质控样本内标化归一的基质效应分别为(99.70±2.30)％,(100.70±0.90)％,(100.70±1.00)％;平均回收率>91.00％.结论 本法简便、准确、灵敏,适用于人血浆中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的检测和药代动力学研究.