目的建立液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS/MS）测定人血浆中西洛他唑浓度。方法用乙腈蛋白沉淀法处理血浆,以西洛他唑-d4为内标,色谱柱:ACE Excel 5 C18-AR（2.1 mm×50 mm,5μm）,柱温:40℃,梯度洗脱,流动相:乙腈（B）-5 mmol·L-1乙酸铵水溶液（含0. 1%甲酸;A）,流速:0.45 mL·min-1,进样量10μL,分析时间3.5 min。用电喷雾电离子化源,正离子方式、多反应监测（MRM）扫描进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 370.2→m/z 288.2（西洛他唑）和m/z 374.2→m/z 288.2（内标西洛他唑-d4）。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度和回收率、基质效应及稳定性。结果血浆样品中西洛他唑回归方程为Y=5.12×10-3X+4.86×10-3（r=0.9954）,西洛他唑在5.00～2000 ng·mL-1内线性关系良好,定量下限为5.00 ng·mL-1,批内、批间精密度均在3.2%～5.8%,相对偏差（RE）在-1.9%～6.6%;低、中、高3个浓度西洛他唑质控样本内标化归一的基质效应分别为（98.1±2.2）%,（98.2±1.3）%和（99.9±1.0）%;提取回收率分别为（90.9±6.3）%,（90.9±9.0）%和（89.3±7.4）%。结论本方法快速、准确、灵敏且高效,适用于人血浆中西洛他唑的检测和药代动力学研究。