资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型:
单位:
[1]华中科技大学同济学院附属同济医院感染科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
感染科
出处:
ISSN:
关键词:
HEV
真核表达
绿色荧光蛋白
摘要:
目的构建基因IV型HEV ORF3的真核表达载体。方法从患者血清中提取HEV RNA,利用RT-PCR技术扩增HEV ORF3基因,EcoRⅠ/BamHⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pEGFPC2真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒pEGFPC2-ORF3。将重组质粒用脂质体法转染HepG2细胞,Western blot分析鉴定EGFP-ORF3融合蛋白的表达。结果真核表达质粒转染HepG2细胞,Western blot在39.8kD左右有一条强的棕色条带。结论成功构建pEGFPC2-ORF3真核表达质粒,在HepG2细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础。
基金:
湖北省科技攻关项目(2007AA301B26)%武汉市科技攻关项目(200761023424)
第一作者:
第一作者单位:
[1]华中科技大学同济学院附属同济医院感染科
推荐引用方式(GB/T 7714):
章述军,田德英,刘曦,等.基因IV型HEV ORF3真核表达质粒的构建与鉴定[J].中国现代医学杂志.2010,20(01):57-59+76.