资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型:
单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
儿科学系
出处:
ISSN:
关键词:
细胞信号转导抑制因子3
短发夹RNA
RNA干扰
摘要:
目的构建针对大鼠细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,选取最有效shRNA模板序列。方法设计并合成编码的shRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,进行序列测定;转染至骨骼肌细胞中。Real-time PCR和Western blot检测各组SOCS-3的表达情况。结果测序证实重组质粒构建成功。4对shRNA模板序列对SOCS-3的表达抑制与空白及阴性对照相比差异均有统计学意义(均P(0.05),且以SOCS-3-shRNA a干预效果较好。结论 SOCS-3特异性shRNA重组表达载体构建成功,能有效抑制大鼠骨骼肌细胞SOCS-3的表达,为后续研究及代谢综合征的基因治疗奠定了基础。
基金:
国家自然科学基金(30772358)%高等学校博士学科点专项科研基金(20060487062)
第一作者:
第一作者单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
推荐引用方式(GB/T 7714):
廖立红,郑锐丹,王成斌,等.细胞信号转导抑制因子3特异性shRNA的构建及鉴定[J].华中科技大学学报(医学版).2011,40(05):546-549+566.