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短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡

Small hairpin RNA targeting rat C5aR can inhibit the cell apoptosis induced by LPS in kidney epithelial cells

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所 教育部/卫生部器官移植重点实验室 [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科
出处:
ISSN:

关键词: RNA干扰 C5aR 基因沉默 凋亡

摘要:
目的:探讨短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果。方法:构建针对大鼠补体受体C5aR基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-C5aR shRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系。实验分为3组,①正常对照组:未转染的RK3E细胞;②阴性对照组:转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;③实验组:转染C5aR shRNA的RK3E细胞系。经脂多糖(LPS)孵育12小时后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达,γ计数仪测定125I标记的C5a与RK3E的结合情况。结果:与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低(P(0.01),C5aR mRNA水平显著降低(P(0.01),125I标记的C5a与RK3E结合活性显著下降。结论:针对C5aR的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的发生。

基金:

基金编号: 30600573

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所 教育部/卫生部器官移植重点实验室
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

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