目的建立LC-MS/MS测定复方制剂中二甲双胍、吡格列酮及其活性代谢产物酮基吡格列酮（M-Ⅲ）、羟基吡格列酮（M-Ⅳ）的浓度。方法 吡格列酮样品以乙腈沉淀蛋白,美金刚为内标,采用Ultimate C18（2.1 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-5 mmol·L-1醋酸铵（55∶45）为流动相,流速为0.3 mL·min-1;二甲双胍样品以乙腈沉淀蛋白,卡马西平为内标,采用Ultimate XB-CN色谱柱（2.1 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-0.1%甲酸水溶液（内含10 mmol·L-1乙酸铵）（73∶27）;流速为0.3mL·min-1,柱温:35℃。结果 吡格列酮、M-Ⅲ、M-Ⅳ线性范围分别为5.08～1 016.0μg·L-1,2.45～490.0μg·L-1,4.20～840.0μg·L-1,定量下限分别为5.08、2.45、4.20μg·L-1,线性良好。提取回收率均大于89.67%,日内日间RSD均小于15%。结论 本法测定准确、简便可靠,适用于复方二甲双胍吡格列酮片的人体药动学研究。