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单位：
[1]广州中医药大学深圳附属医院 < 深圳市中医院 > 广东深圳 518033
深圳市中医院
深圳医学信息中心
[2]华中科技大学同济医学院附属同济医院 湖北武汉 430074
华中科技大学同济医学院附属同济医院
出处：
ISSN：
关键词：
血管内皮生长因子受体3
逆转录病毒
载体
HepG2细胞
摘要：
目的构建在人肝癌HepG2细胞内可稳定表达血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)的逆转录病毒载体。方法采用PCR技术扩增VEGFR3片段，克隆至pBABE-puro质粒，构建重组质粒pBABE-puro-VEGFR3，经PCR﹑酶切﹑测序等验证后，体外与PIK包装质粒共同转染293FT细胞，获得携带VEGFR3基因的重组逆转录病毒，感染人肝癌HepG2细胞，获得转入VEGFR3的HepG2细胞，通过QPCR和Western blot进一步验证VEGFR3在HepG2细胞内的表达。结果①获得携带VEGFR3基因的重组质粒pBABE-puro-VEGFR3和人肝癌细胞株HepG2-pBABE-puro-VEGFR3；②QPCR和Western blot分别检测到VEGFR3在靶细胞HepG2-pBABE-puro-VEGFR3中的稳定表达。结论成功构建了携带VEGFR3基因的人肝癌细胞重组逆转录病毒载体。
基金：
国家自然科学基金资助项目(编号30873245)；深圳市科技计划项目(201202154)
第一作者：
第一作者单位：
[1]广州中医药大学深圳附属医院 < 深圳市中医院 > 广东深圳 518033
推荐引用方式(GB/T 7714)：
魏春山,童光东,王宏艳.人肝癌血管内皮生长因子受体3逆转录病毒载体构建[J].医药前沿.2014,(17):49-52.
