摘要：
目的构建高表达含人神经生长因子β基因（hNGF-β）的逆转录病毒载体,并检测其在施万细胞中的表达情况。方法从含有hNGF-β的pAAV-SP质粒中克隆出hNGF-β,连接到pEGFP-N1载体中,形成重组逆转录病毒载体pEGFP-N1-NGFβ。用重组体转染施万细胞,经G418筛选出阳性克隆后,用ELISA法检测NGF的表达量。结果 hNGF-β的RT-PCR产物约750bp,双酶切鉴定重组载体为正确重组子。荧光显微镜下观察证实转染的施万细胞表达EGFP,ELISA检测证实转染的施万细胞分泌hNGFβ升高。结论应用体外连接法成功构建了hNGF-β逆转录病毒载体,而且施万细胞能够高效表达NGFβ。
