资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
单位：
[1] 华中科技大学同济医学院病原生物学系
[2] 华中科技大学同济医学院
[3] 华中科技大学同济医院感染科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
感染科
出处：
ISSN：
关键词：
莫洛尼鼠白血病病毒
人类免疫缺陷病毒
整合酶
溴结合蛋白(Brd2)
荧光蛋白
摘要：
目的构建绿色荧光蛋白标记的莫洛尼鼠白血病病毒（MLV）和人类免疫缺陷病毒（HIV）整合酶及红色荧光蛋白标记的Brd2的真核表达质粒,为研究整合酶与Brd2相互作用打下基础。方法以Prr88-MLV、HIV质粒pNL4-3及含有Brd2的质粒为模板,采用PCR技术扩增MLV-IN、HIV-IN、Brd2片段;利用酶切反应体系构建psectag2A-GFP-mIN、psectag2A-GFP-hIN、pDsred2-N1-Brd2质粒,0.8%琼脂糖凝胶电泳后进行测序分析;用重组质粒转染293T细胞,荧光显微镜观察目的蛋白表达情况,并进行WB鉴定。结果构建psectag2A-GFP-hIN、psectag2AGFP-mIN、pDsred2-N1-Brd2的真核表达质粒,酶切以及测序结果与预期相符。将上述质粒分别转染293T细胞,WB及荧光显微镜均检测到目的蛋白的表达。结论成功构建了绿色荧光标记的HIV、MLV整合酶真核表达质粒和红色荧光蛋白标记的Brd2真核表达质粒,尽管Brd2真核表达质粒荧光相对较弱,但这对整合酶与Brd2相互作用研究奠定了基础。
基金：
湖北省卫计委面上基金项目 (WJ2017M049)
第一作者：
第一作者单位：
[1] 华中科技大学同济医学院病原生物学系
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
汪速飞,杨梓艺,魏巍,等.荧光蛋白标记逆转录病毒整合酶及Brd2真核表达载体的构建[J].中国病原生物学杂志.2018,13(07):699-703.
