目的靶向特异尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）-siRNA慢病毒表达载体并加载绿色荧光蛋白（GFP）后转染软骨细胞,观察其对软骨细胞表达uPA和基质金属蛋白酶3（MMP-3）的影响。方法培养软骨细胞并根据实验分为实验组（转染uPAsiRNA慢病毒载体）、空载体组（转染空慢病毒载体）、空白对照组（未进行任何处理）和TIMP组（加载MMP特异性抑制剂TIMP）。实验组:uPA-siRNA序列经慢病毒包装并加载GFP,通过Lipofectamine 2000转染入兔软骨细胞;空载体组:将慢病毒载体通过Lipofectamine 2000转染入兔软骨细胞;空白对照组正常培养软骨细胞;药物对照组:培养基中加特异性MMP抑制剂。所有细胞培养96h后应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）法分别检测软骨细胞uPA mRNA、MMP-3mRNA和蛋白的表达水平。结果慢病毒载体可成功转染到原代软骨细胞中,在感染复数（MOI）为100时转染率达到85%以上。实验组uPA mRNA、uPA蛋白和MMP-3mRNA及MMP-3蛋白的表达水平显著低于空载体组和空白对照组（P(0.01）,而与药物干预组差异无统计学意义（P)0.05）。结论 uPA-siRNA慢病毒载体负载GFP可稳定转染软骨细胞并高效抑制uPA基因、蛋白表达,同时对MMP-3基因、蛋白表达也呈现高效抑制作用。抑制uPA的水平可降低显著MMP-3表达。