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慢病毒介导的shRNA对大鼠脑纹状体GCDH蛋白的沉默效应研究

Silencing of GCDH expression by Lentivirus-Mediated RNA Interference in Brain Striatal of Rats

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科 [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院病理科
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关键词: GCDH 慢病毒载体 脑立体定位注射 纹状体

摘要:
目的:利用已成功构建的慢病毒载体,检测慢病毒介导的GCDH基因沉默对大鼠脑纹状体GCDH蛋白表达下调的能力。方法:30只健康雄性刚断乳3~4周SD大鼠随机分为绿色荧光蛋白(GFP)对照病毒注射组(对照组)和GCDH慢病毒注射组(GCDH组)各15只。各组分别在脑立体定位仪下定位纹状体组织后单侧给予GFP对照病毒2μL和GCDH慢病毒原液2μL。注射后14 d及1、3月,分别处死大鼠,并取注射区域的脑纹状体组织蛋白质通过Western blot及石蜡切片免疫组化法检测大鼠纹状体GCDH蛋白表达水平,同时测定肝肾功能、血清有机酸及Rotarod行为学。结果:GCDH慢病毒注射14 d及1、3月后,GCDH组可检测到注射区域GCDH蛋白在脑纹状体区域表达有明显降低,同对照组比较差异有统计学意义(P(0.05),2组肝肾功能、血清有机酸及行为学未发现明显差异。结论:成功注射GCDH慢病毒到刚断乳3~4周SD大鼠脑纹状体,并在注射后不同时间均检测到GCDH蛋白的表达稳定下调。

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第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科
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