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携带小鼠Shh基因慢病毒表达载体的构建实验

Establishment of a lentiviral vector carrying mouse Shh gene in vitro

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心
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关键词: 慢病毒载体 Sonic Hedgehog 基因传递 骨组织工程

摘要:
目的:构建Sonic Hedgehog(Shh)基因慢病毒载体,并进行鉴定。方法:构建携带Shh基因慢病毒表达质粒载体p LV.Ex2d.P/puro-EF1A-m Shh,RT-PCR反应和基因测序证实质粒载体构建成功。对载体进行包装,测定病毒滴度。将携带Shh基因慢病毒颗粒以感染复数(MOI=10)转导HT1080细胞,使用RT-PCR法检测转导细胞中Shh基因的表达。结果:成功构建携带Shh基因的慢病毒表达载体(Lenti-Shh),病毒滴度为2.9×107TU/m L。RTPCR检测结果证明Lenti-Shh转导细胞成功表达Shh基因。结论:成功构建小鼠Shh慢病毒载体系统,为基因增强型骨组织工程提供可靠的基因传递载体。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心
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