目的研究靶向于HPV16型的-E7（HPV16-E7）基因的成簇规律间隔短回文重复序列及其相关系统（CRISPR/Cas）对HPV16阳性宫颈癌细胞株SiHa增殖和凋亡的影响及其机制。方法培养HPV16阳性的宫颈癌细胞株SiHa和HPV阴性的人胚肾上皮细胞株HEK293,分别将SiHa细胞和HEK293细胞分为3组:Cri组（按照1:3的比例转染向导RNA与Cas9质粒）、C9组（只转染等量的Cas9质粒）和对照组（不处理）。T7核酸内切酶Ⅰ法检测双链DNA断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法评价细胞增殖,Western blotting检测E7和成视网膜母细胞瘤蛋白（pRb）表达。结果转染48 h后,SiHa细胞Cri组PCR产物被切开。SiHa细胞Cri组凋亡率为26.6%,明显高于对照组（2.6%,x2=5.455,P=0.020）和C9组（3.1%,x2=6.279,P=0.012）。HEK293细胞对照组、C9组和Cri组的凋亡率分别为7.4%、7.6%、7.9%,Cri组与对照组和C9组比较,差异均无统计学意义（x2=0.032,P=0.858;x2=0.034,P=0.853）。转染72 h后,SiHa细胞Cri组增殖抑制率为29.4%,明显高于对照组（15.0%,x2=22.481,P=0.000）和C9组（18.0%,x2=24.879,P=0.000）。Cri组HEK293细胞在72 h的增殖抑制率为3.2%,与C9组（2.2%,x2=2.857,P=0.091）和对照组（2.3%,x2=3.438,P=0.064）比较差异均无统计学意义。转染48 h后,与对照组相比,SiHa细胞Cri组E7蛋白表达明显下调,pRb蛋白表达明显上升,而C9组E7蛋白和pRb蛋白含量没有明显变化。结论靶向HPV16-E7的CRISPR可以特异性地促进HPV16阳性的SiHa细胞凋亡、抑制细胞增殖。其机制可能是通过特异性地作用于HPV16-E7基因使其双链DNA断裂、功能破坏,同时上调抑癌蛋白pRb表达。