资源类型：
收录情况：
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
◇ 中华系列
文章类型：
单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所
华中科技大学同济医学院附属同济医院
泌尿外科研究所
外科学系
泌尿外科
[2] 上海交通大学附属第六人民医院
出处：
ISSN：
关键词：
微小RNA
双链RNA
RNA激活
p21
膀胱癌
摘要：
目的人工合成与微小RNA（miRNA,miR）-1236所作用的p21基因启动子靶序列完全互补配对的4对小分子双链RNA（dsRNA）:dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244和dsP21-245（dsP21-243序列配对程度最高）,分别观察其与miR-1236在激活人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中抑癌基因p21表达能力的差异。方法参照小激活RNA（saRNA）的设计原则设计合成4对dsRNA。分别转染阴性对照组（dsControl）、阳性对照组（miR-1236）和实验组（dsRNA）至T24和EJ细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot分别检测p21 mRNA和蛋白表达的水平。结果 FQ-PCR检测结果显示实验组中仅dsP21-245能明显促进两种细胞中p21mRNA水平的升高;且与阴性对照组比较,dsP21-245分别上调T24和EJ细胞中p21 mRNA的表达至2.32倍（P(0.01）和2.84倍（P(0.01）;与阳性对照组比较,两种细胞株中p21 mRNA的表达差异均没有统计学意义（P)0.05）。RT-PCR检测结果证实了p21 mRNA表达变化的趋势。Western blot结果显示在两种细胞株中p21蛋白表达水平的升高与p21 mRNA水平的上调一致。其余3对dsRNA均未能显著上调两种细胞株中p21基因的表达（P)0.05）。结论人工合成的dsP21-245能显著促进膀胱癌细胞中p21的高表达,且与miR-1236激活p21表达的能力差异无统计学意义。
基金：
国家自然科学基金(81372759)National Natural Science Foundation of China (81372759)
第一作者：
第一作者单位：
[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北省泌尿外科研究所
推荐引用方式(GB/T 7714)：
盖强强,汪成合,陈忠,等.微小RNA-1236和外源性小分子双链RNA激活膀胱癌细胞p21表达作用的比较[J].中华实验外科杂志.2016,33(12):2662-2665.
