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◇ CSCD-E
◇ 中华系列
文章类型：
单位：
[1]湖北省天门市第一人民医院泌尿外科, 天门,431700
[2]华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科研究所
华中科技大学同济医学院附属同济医院
泌尿外科研究所
外科学系
泌尿外科
出处：
ISSN：
关键词：
RNA激活
小激活RNA
p21基因
启动子相关
摘要：
目的 探讨针对p21基因启动子序列不同转录起始位点设计的小双链RNA(dsRNA)对p21基因表达的正向调控作用.方法 针对p21基因启动子DNA序列设计合成4对dsRNA分子dsP21-382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625,转染入体外培养的人膀胱肿瘤细胞株5637细胞及T24细胞中,并以具有激活功能的dsRNA分子dsP21-322作为阳性对照,以未转染的5637和T24细胞为空白对照,以dsControl为阴性对照.采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Westernblot等观察各dsRNA转染后,细胞内p21基因mRNA及蛋白表达量的差异,以及dsRNA转染对肿瘤细胞株生长的影响.结果 PCR结果显示,与空白对照组比较,dsP21-382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调5637细胞中p21 mRNA的表达1.56、1.88、2.41和1.74倍(P＜0.05),dsP21-382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调T24细胞中p21 mRNA的表达1.71、1.69、2.62和1.85倍(P＜0.05).Western blot结果显示,与空白对照组比较,p21蛋白表达的升高与p21mRNA水平的升高一致.4对dsRNA均能显著抑制膀胱肿瘤细胞株的生长.结论 dsRNA对基因表达正向调控作用可能是一种普遍现象.
基金：
国家自然科学基金资助项目(81372759)
第一作者：
第一作者单位：
[1]湖北省天门市第一人民医院泌尿外科, 天门,431700
推荐引用方式(GB/T 7714)：
龚化,陈忠,盖强强,等.不同启动子相关双链小分子RNA介导激活p21 Waf1/Cip1基因研究[J].中华实验外科杂志.2015,32(12):2990-2992.
