目的构建可表达具有RNA激活功能的小激活RNA（saRNA）质粒表达载体,并对其激活前列腺癌细胞PC-3中p21WAF1/CIP1（p21）基因表达的功能进行相关研究。方法人工合成与p21基因启动子特定序列相应的DNA片段及同样长度的随机DNA序列,利用DNA重组技术将这些片段构建到真核小分子双链RNA（dsRNA）表达质粒pGenesil-1中,构建成能表达dsRNA片段的表达质粒载体（dsRNAp21-pGenesil-1）和随机对照dsRNA片段的表达质粒载体（dsRNACon-pGenesil-1）。采用脂质体介导方法,分别将dsRNAp21-pGenesil-1（实验组）、dsRNACon-pGenesil-1（随机对照组）及空白质粒pGenesil-1（空白对照组）转染到体外培养的PC-3细胞,通过荧光染色检测转染效率,采用RT-PCR和免疫组化技术检测各组细胞p21蛋白表达的差异。结果成功构建目的表达载体dsRNAp21-pGenesil-1及随机对照载体dsRNACon-pGenesil-1,将各组质粒转染到PC-3细胞后,实验组p21基因表达明显增强,而随机对照组和空白对照组无明显变化。结论本研究构建的dsRNA表达质粒载体能成功表达saRNA分子,并激活p21基因及蛋白的表达,为研究的激活效应提供有效工具。