目的在膀胱癌细胞系T24和EJ细胞中转染两种不同的人工合成小分子双链RNA（dsRNA）,观察联合应用与分别单独应用两种dsRNA对膀胱癌细胞生长的影响。方法根据对膀胱癌细胞的处理不同分为:1阴性对照组（dsControl）、dsP21-322组、dsP21-555组和dsP21-322+dsP21-555组;2dsControl组、dsP21-322组、dsP53-285组和dsP21-322+dsP53-285组。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测各组细胞p21 mRNA及细胞周期依赖性激酶CDK4、CDK6mRNA的表达;蛋白印迹法（Western blot）检测P21蛋白和CDK4、CDK6蛋白的表达;细胞增殖实验检测转染后细胞增殖能力;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖能力。结果qPCR结果显示,与dsControl组相比,dsP21-322组、dsP2l-555组和dsP53-285组均分别上调T24和EJ细胞中p21mRNA的表达（P(0.01）;而与单独转染dsP21-322、dsP2l-555相比,同时转染dsP21-322+dsP21-555,差异无统计学意义（P)0.05）。与dsControl组相比,dsP53-285能够上调p53基因的表达（P(0.05）;与单独转染dsP53-285相比,p53 mRNA表达在同时转染dsP21-322和dsP53-285组中差异无统计学意义（P)0.05）。与单独转染dsP21-322、dsP53-285相比,dsP21-322+dsP53-285能够显著增加p21 mRNA的表达（P(0.05）。与dsControl相比,转染dsP21-322、dsP53-285分别使T24和EJ细胞中CDK4、CDK6 mRNA的表达下调（P(0.05）;与单独转染dsP21-322、dsP53-285相比,CDK4/6mRNA的表达在dsP21-322+dsP53-285组中明显被抑制（P(0.05）。Western blot检测结果验证了组间p21和CDK4/6基因表达的差异。细胞增殖实验结果显示,同时转染dsP21-322和dsP53-285比单独转染抑制膀胱癌细胞增殖能力更明显。细胞集落形成实验中,dsP21-322+dsP53-285组中形成的集落数量显著少于单独转染组。结论同时转染dsP21-322和dsP53-285能够显著抑制膀胱癌细胞的增殖。