目的探讨膀胱癌微环境中轴突导向因子4D （semaphorins 4D,Sema4D）在肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）上的表达特点。方法膀胱癌细胞系T24与M0型巨噬细胞共培养,通过实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测不同表型巨噬细胞及共培养组巨噬细胞中Sema4D表达量;收集37例膀胱癌患者的临床资料、病理肿瘤组织和10例癌旁正常组织,应用免疫组化染色法和免疫荧光双标法检测CD163、Sema4D表达量,对TAM浸润性及其Sema4D表达率进行临床验证。结果极化诱导以及共培养后,PCR结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义（P=0.019 0,P=0.018 0）,T24+M0组巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义（P=0.006 6,P=0.025 4）;ELISA结果显示M2型巨噬细胞中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义（P=0.005 2,P=0.005 8）,T24+M0组巨噬细胞培养上清液中Sema4D的表达量明显高于M0和M1型巨噬细胞,差异均有统计学意义（P=0.002 6,P=0.026 9）。肿瘤组织中CD163+细胞计数高于癌旁正常组织（36.05±14.56 vs. 12.10±5.70）,差异有统计学意义（P(0.01）;肿瘤组织中Sema4D表达高于癌旁正常组织（39.14±12.34 vs. 11.00±4.65）,差异有统计学意义（P(0.01）,且肿瘤组织中Sema4D+TAM百分比高于癌旁正常组织（67.44±13.74 vs. 21.04±1.80）,差异有统计学意义（P(0.000 1）。肌层浸润性膀胱癌（muscle-invasive bladder cancer,MIBC）组织中CD163+细胞计数和Sema4D表达均高于癌旁正常组织（43.37±12.48 vs. 28.33±11.98;48.78±10.18 vs.34.74±12.59）,差异有统计学意义（P=0.000 9,P=0.025 8）,且MIBC组织中Sema4D+TAM百分比高于非肌层浸润性膀胱癌（non-muscle-invasive blad-der cancer,NMIBC）组织（70.78±11.74 vs. 60.58±12.05）,差异有统计学意义（P=0.016 0）。TAM浸润性（CD163+细胞计数）及其Sema4D表达率与肿瘤T分期均呈正相关（P=0.002 5,P=0.020 1）,与病理分级均呈正相关（P=0.009 0,P=0.003 1）,但与患者性别、年龄和肿瘤最大直径均无相关性（P)0.05）。结论膀胱癌微环境中,M2型巨噬细胞表达Sema4D,可能导致膀胱癌增殖和侵袭。M2型巨噬细胞浸润性及其Sema4D表达率与膀胱癌发生和肌层浸润密切相关。