摘要：
目的:研究肺癌A549细胞条件培养液（conditioned medium,CM）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endo-thelial cells,HUVECs）生存活性和凋亡的影响,以及PI3K-Akt信号通路在其中的作用。方法:用制备获得的人肺癌A549细胞CM培养HUVECs;XTT法检测HUVECs活性;Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;FCM法检测细胞的凋亡率;Western印迹法检测Akt总蛋白和磷酸化Akt蛋白表达。分别用特异性PI3K抑制剂wortmannin（WT）和针对Akt1基因的siRNA（siAkt1）转染HUVECs,RT-PCR法检测Akt亚型mRNA的表达,并观察上述各指标的变化。结果:在CM刺激后24h,HUVECs活性明显增强（P=0.037）,凋亡率下降（P=0.001）。CM呈时间依赖性激活HUVECsAkt磷酸化,CM处理后15min即显示磷酸化Akt水平增高,30min达高峰,此后呈下降趋势。WT或siAkt1转染均能阻断前述效应。结论:肺癌A549细胞CM经PI3K-Akt途径促进HUVECs存活并抑制其凋亡,其中Akt1起关键作用。
