摘要:
目的利用已构建的带有内皮抑素基因真核表达载体质粒导入裸鼠ACHN肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞中,研究内皮抑素基因对RCC细胞增殖和凋亡的影响。方法ACHN细胞浓度1×107个/L,经裸鼠右侧背部皮下注射0.2 ml,共注射24只裸鼠。荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只。治疗组:每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl(内含30μl梭华-SofastTM和30μg pSecES质粒);对照组:每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl(内含30μl梭华-SofastTM和30μg pcDNA3.1质粒);空白组:每只裸鼠瘤内3点注射生理盐水100μl。各组每只裸鼠间隔3 d注射1次,连续注射3次。以增殖细胞核抗原(PCNA)作为细胞增殖状态,按链霉亲和素生物素法(SABC)进行免疫组化染色。细胞凋亡检测用TUNEL法。结果内皮抑素真核表达质粒能显著抑制裸鼠ACHN RCC肿瘤体积增长,pSecES治疗组平均瘤重明显小于空白组和对照组(P(0.01),与空白组的肿瘤生长抑制率为34.48%,与对照组的肿瘤生长抑制率为40.68%。治疗组肿瘤细胞的凋亡指数(AI)明显高于对照组和空白组(P(0.01)。pSecES治疗组肿瘤组织的AI/PI比值明显高于对照组和空白组(F=189.27,P(0.05)。Spearman相关分析表明,肿瘤体积与细胞增殖之间无明显相关性(r=-0.041 2,P)0.05),肿瘤体积与细胞凋亡呈负相关(r=-0.734 6,P(0.01)。结论内皮抑素基因治疗可使裸鼠ACHN RCC肿瘤细胞凋亡增加,肿瘤细胞的数量减少,在总体上表现为肿瘤的生长变慢、体积变小。