摘要：
目的 探讨小分子干扰RNA(small interference RNA,SiRNA)抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2(thioredoxin-2,Trx-2)对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadenine dinucleotide,NADH)脱氢酶亚单位1(NADH dehydrogenase subunit 1,ND1)及细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome C oxidase Ⅰ,COX Ⅰ)表达的影响. 方法 体外传代培养A549细胞系,将Trx-2序列特异性的SiRNA转染A549细胞,随机分为无干扰空气组、无干扰高氧组、干扰后空气组与干扰后高氧组.分别于高氧或空气暴露12、24、48 h提取A549细胞总RNA和蛋白.采用逆转录.聚合酶链反应技术测定Trx-2、ND1和COX Ⅰ mRNA水平的表达,Western印迹技术检测Trx-2蛋白的表达. 结果 (1)序列特异性SiRNA可显著抑制Trx-2表达.(2)无干扰高氧组24 h Trx-2mRNA水平为0.7799-4-0.1249,显著高于无干扰空气组(0.4424±0.1140)(P<0.05).干扰后高氧组24 h Trx-2 mRNA水平为0.2774±0.0174、48 h为0.2587±0.0069,均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组(P<O.05).(3)无干扰高氧组24 h ND1 mRNA水平为0.6609±0.0368,显著低于无干扰空气组(0.8898±0.1049)(P<0.05).干扰后高氧组12 h ND1 mRNA水平为0.8848±0.0135,显著高于干扰后空气组(P<0.05).干扰后高氧组48 h ND1 mRNA水平为0.3808±0.0937,均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组(P<0.05).(4)无干扰高氧组12 h COX Ⅰ mRNA水平为1.7313±0.4331、24 h为2.1929±0.6722、48 h为2.0754±0.2584,均显著高于无干扰空气组(P<0.05). 结论 ND1、COX Ⅰ参与高氧肺损伤发生发展过程,Trx-2对高氧肺损伤线粒体起重要的保护作用.
