目的探索小分子干扰RNA（siRNA）沉默A549细胞肺表面活性蛋白A（SP-A）基因后高体积分数氧（高氧）对其的影响,探讨SP-A蛋白在高氧肺损伤中的作用。方法体外传代培养A549细胞,将细胞随机分为沉默组、对照组。以Lipofectamine2000转染特异性SiRNA SP-A转入A549细胞,持续置于高氧（950 mL/L O2和50 mL/L CO2）中,分别于培养48 h、72 h、96 h提取A549细胞的总蛋白,收集培养上清。采用Westernblot检测SP-A蛋白的表达,噻唑兰（MTT）检测细胞增殖能力,硫代巴比妥酸（TAB）比色法检测培养基上清中丙二醛（MDA）水平。结果序列特异性SiRNA可显著沉默SP-A基因表达,其中SiRNA SP-A2的沉默效率最高（97%）。高氧干预下,与对照组相比,沉默组A549细胞SP-A蛋白表达在高氧48 h、72 h时均显著减少（P均(0.05）,沉默组A549细胞增殖能力在高氧48 h、72 h、96 h均受到明显抑制（P均(0.05）。但2组间培养基中MDA水平未见明显差异（P)0.05）。结论 SP-A基因沉默后A549细胞抗高氧能力下降,表明SP-A可能在高氧肺损伤过程起保护作用。