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携带TPH-2基因小分子干扰RNA表达载体的构建与鉴定

Construction and identification of recombinant TPH2-targeted small interfering RNA expression vector

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

单位: [1]广东省中医院麻醉科, 广州,510120 [2]广东省中医院皮肤科, 广州,510120 [3]华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科
出处:
ISSN:

关键词: 色氨酸羟化酶 RNA干扰 表达载体

摘要:
目的 构建携带色氨酸羟化酶(TPH)-2基因的小分子干扰RNA表达载体.方法 设计并合成shRNA TPH-2对应的两条互补的寡核苷酸链,pU6-CMV-GFP质粒经Age Ⅰ和EcoRⅠ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,目的 质粒转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落聚合酶链反应(PCR)鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析.结果 经PCR、酶切及测序证实,pU6-CMV-GFP-TPH-2 shRNA表达载体片段大小为332 bp,其中插入的片段序列和位点与预期完全一致.结论 实验成功构建pU6-CMV-GFP-TPH2 shRNA表达载体.

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第一作者:
第一作者单位: [1]广东省中医院麻醉科, 广州,510120
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

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