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shRNA慢病毒抑制BGC823细胞株GnT-V表达的载体构建

Inhibition of GnT-V gene expression in BGC823 cell line by using Lentivirus-mediated shRNA

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]同济大学附属同济医院消化内科,上海,200065
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关键词: N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V RNA干扰 慢病毒

摘要:
目的 构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(GnrV)基因的 shRNA(short harpin RNA,siRNA前体)表达栽体,鉴定GnT-V基因干扰效率.方法 体外设计并合成针对GnT-V基因的慢病毒shRNA干扰载体,通过PCR及测序证实载体构建成功.将慢病毒颗粒以最适滴度转染人低分化胃癌细胞株BGC823,应用Real-Time PCR、Western blotting检测GnT-V抑制效率.结果 构建的慢病毒载体的序列通过PCR、测序等鉴定证实与设计序列相同;Real-Time PCR检测显示干扰组BGC823细胞GnT-V mRNA表达率下降88.04%,Western blotting显示干扰组BGC823细胞表达GnT-V蛋白量较空白载体对照组明显减少.结论 构建的shRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制BGC23细胞株GnT-V基因的表达.

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第一作者:
第一作者单位: [1]同济大学附属同济医院消化内科,上海,200065
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