摘要:
目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对支气管哮喘(简称哮喘)患者血清致敏的人气道平滑肌细胞(HASMC)增殖作用及其可能机制。方法原代培养HASMC,取第4~8代细胞,用10%哮喘患者血清致敏HASMC,分为血清组、血清+CSE组、血清+GW8510(嘧啶基-苯磺酰胺,细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂)组、血清+CSE+GW8510组,以10%非哮喘患者血清为对照组。用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法及3H-TdR掺入法检测HASMC增殖,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达。结果血清组HASMC的S+G2M期比例、吸光度(A)值和细胞DNA合成量[分别为(21.4±1.1)%、0.39±0.12和2669±138]明显高于对照组,差异均有统计学意义(q值分别为6.25、5.61、6.82,均P(0.01);血清+CSE组HASMC的S+G2M期比例、A值和DNA合成量分别为(33.3±1.3)%、0.61±0.20和3552±303,与血清组比较差异均有统计学意义(q值分别为5.67、6.32、5.56,均P(0.01);血清+GW8510组HASMC的S+G2M期比例、A值和DNA合成量分别为(14.7±1.4)%、0.30±0.10和1812±109,与血清组比较差异均有统计学意义(q值分别为6.02、5.53、5.79,均P(0.01)。血清+CSE组HASMC cyclinD1 mRNAA值比和蛋白表达A值比分别为0.521±0.102和0.312±0.002,与血清组(分别为0.291±0.112和0.186±0.002)比较,差异均有统计学意义(q值分别为12.02和9.26,均P(0.01);血清+GW8510组分别为0.223±0.038、0.150±0.002,与血清组比较差异均有统计学意义(q值分别为6.86、5.60,均P(0.01)。结论 CSE可能通过cyclinD参与调控哮喘患者血清致敏的HASMC增殖。