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小鼠pDsRed-Meis1真核表达载体构建及子宫内表达的鉴定

Construction of pDsRed-Meis1 expression vector and its expression in murine uterus

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ CSCD-C

单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科生殖中心
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关键词: meis1基因 重组质粒 宫腔内转染

摘要:
目的构建小鼠Myeloid ectropic viral integration site 1(Meis1)基因和红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)真核表达质粒,为进一步研究Meis1在生殖系统中的功能提供基础。方法设计引物,扩增含Meis1片段的克隆质粒中的meis1基因片段,将其插入真核表达载体pDsRed-N1,重组质粒经酶切鉴定后测序,并转染至小鼠子宫;用Western blot及免疫组织化学方法鉴定外源基因Meis1的表达。结果酶切和测序结果表明,构建的pDsRed-Meis1重组质粒正确;West-ern blot结果显示,外源性Meis1高表达于孕D2的小鼠子宫;转染后冰冻切片结果显示,带红色荧光蛋白的阳性产物表达于孕D4的小鼠子宫内膜及全层;免疫组织化学结果显示,Meis1阳性产物主要表达于孕小鼠子宫上皮、腺体和基质细胞内。结论正确构建了pDsRed-Meis1真核表达质粒,并成功转染及高表达于小鼠子宫,为进一步探讨Meis1在生殖系统中的功能提供了有利工具。

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第一作者:
第一作者单位: [1]华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科生殖中心
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