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单位：
[1] 湖北医药学院附属太和医院感染科
[2] 湖北医药学院附属太和医院生物医学研究所
[3] 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室
华中科技大学同济医学院附属同济医院
临床免疫研究室
出处：
ISSN：
关键词：
土拨鼠肝炎病毒
土拨鼠肝炎病毒X蛋白
RNA干扰
小干扰RNA
摘要：
目的:研究土拨鼠肝炎病毒（WHV）序列特异性siRNA对WHV X基因表达的抑制作用。方法:以WHV全长质粒为模板PCR扩增WHV X基因,克隆到pXF3H载体构建WHX-HA融合蛋白真核表达质粒（pXF3H-WHx）;合成siRNA的模板序列,克隆到siRNA表达质粒psiRNA构建shRNA表达质粒（psiWx1、psiWx2）;质粒pXF3H-WHx与psiWx1、psiWx2共转染Hela细胞,Western blot检测WHV X蛋白的表达。结果:Hela细胞中WHVX蛋白的表达受siRNA的抑制,psiWx1表达的siRNA抑制90%以上的X蛋白表达,并呈剂量依赖性,但是WHV X基因靶位点中2个突变的核苷酸可使这种干扰作用消失。结论:质粒表达的siRNA序列特异性抑制WHV X蛋白的表达。
第一作者：
第一作者单位：
[1] 湖北医药学院附属太和医院感染科
[2] 湖北医药学院附属太和医院生物医学研究所
推荐引用方式(GB/T 7714)：
孟忠吉,吴珺,张永红,等.RNA干扰抑制土拨鼠肝炎病毒X基因表达[J].湖北医药学院学报.2011,30(05):475-479.
