目的:构建含有可溶性环氧化物水解酶（sEH）基因特异性的RNA干扰序列质粒,选择性下调小鼠心肌细胞sEH的表达,筛选出抑制sEH效果最明显的表达质粒;观察其对异丙基肾上腺素（ISO）诱导的心肌细胞的凋亡及相关基因的影响。方法:构建2条靶向sEH基因的特异性小干扰RNA（siRNA）质粒EH-1和EH-2,以含非特异性siRNA编码序列的质粒（PCN）为阴性对照,用FuGENE HD转染原代培养的心肌细胞,通过半定量RT-PCR和Western blot法检测sEH的mRNA和蛋白的表达情况,筛选出抑制sEH效果最明显的表达质粒,命名为EH-R。采用浓度为10μmol.L-1ISO诱导心肌凋亡。分为正常对照组、ISO组、PCN+ISO组和EH-R+ISO组。利用EH-R下调心肌细胞sEH基因的表达,观察其对ISO诱导的心肌细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测各组细胞凋亡的发生率,Western blot法检测各组Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。结果:质粒EH-R组心肌细胞sEH的mRNA和蛋白质表达较其余组明显降低,差异有统计学意义（P(0.01）。与正常对照组相比,应用ISO各组,心肌细胞凋亡率明显升高,心肌细胞的Bax表达升高,而Bcl-2表达下降（P(0.01）。然而EH-R+ISO组与ISO组和PCN+ISO组相比心肌细胞凋亡率明显降低;心肌Bax表达降低,Bcl-2表达升高（P(0.01）。结论:构建了特异性小干扰RNA质粒,利用RNAi技术成功下调了原代培养的心肌细胞中sEH的表达,从而增加了抑凋亡基因Bcl-2的表达,减轻了ISO诱导心肌细胞的凋亡。为进一步进行心肌细胞的RNA干扰研究奠定了基础。