摘要:
目的评价及比较两种转染试剂Lipofectamine 2000和jetPRIMETM对A549细胞的转染效率及毒性。方法分别利用Lipofectamine 2000和jetPRIMETM将pEGFP-N1质粒转染A549细胞,转染24h后荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达,计算转染效率,四甲基偶氮唑盐比色法[3-(4.5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]检测两种转染试剂对A549细胞的毒性。结果质粒与Lipofectamine 2000比例(μg/μl)在1∶2至1∶3.5之间变化时,Lipofectamine 2000转染效率变化不明显,细胞毒性随着Li-pofectamine 2000用量增多而增大,质粒与Lipofectamine 2000比例(μg/μl)为1∶2.5时转染率最高,达(50.6±4.9)%,细胞存活率为(89.2±9.1)%;质粒与jetPRIMETM比例(μg/μl)在1∶1至1∶4之间变化时,jetPRIMETM转染效率变化明显,而细胞毒性变化不明显,质粒与jetPRIMETM比例(μg/μl)为1∶2时转染率最高,为(30.6±2.8)%,细胞存活率为(100.6±4.8)%;两者最大转染率及相应的细胞存活率均有统计学差异(P(0.01,P(0.05)。结论 Lipofectamine 2000转染A549细胞的效率高于jetPRIMETM,细胞毒性亦强于jetPRIMETM。