摘要:
目的探讨鼠双微粒体2(MDM2)在小檗碱诱导儿童急性淋巴细胞白血病EU-4细胞凋亡中的作用。方法取对数生长期的EU-4细胞进行实验。终浓度为0、1、10、100μmol/L小檗碱分别作用72 h后,流式细胞仪检测以上各组细胞凋亡情况,Western blot法检测以上各组细胞MDM2蛋白表达水平。100μmol/L小檗碱分别作用0、24、48、72 h,采用实时荧光定量PCR法检测MDM2基因表达水平。使用终浓度为150 nmol/L MDM2小干扰RNA(siRNA)转染MDM2 siRNA组细胞,相同终浓度对照siRNA转染对照siRNA组细胞,48 h后采用流式细胞仪检测2组细胞凋亡情况。结果经不同浓度小檗碱作用后,EU-4细胞凋亡率呈逐渐上升趋势,100μmol/L小檗碱作用72 h后细胞凋亡率最高达(60.13±4.21)%,各组差异均有统计学意义(F=280.56,P(0.05);MDM2蛋白表达水平则随小檗碱浓度上升逐渐降低,差异有统计学意义(F=73.82,P(0.01)。MDM2 mRNA表达水平随小檗碱作用时间延长逐渐降低,差异有统计学意义(F=45.37,P(0.01)。对照siRNA组及MDM2 siRNA组细胞凋亡率为(11.09±1.63)%和(29.84±1.75)%,2组比较差异有统计学意义(t=-13.57,P(0.01)。结论小檗碱浓度和时间依赖地抑制MDM2的表达,可能是小檗碱诱导白血病细胞凋亡的机制之一。