资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型:
单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科
华中科技大学同济医学院附属同济医院
检验科
[2]华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
华中科技大学同济医学院附属同济医院
生物医学中心
出处:
ISSN:
关键词:
酵母双杂交
HIV Tat
蛋白质相互作用
天然免疫
病毒复制
摘要:
目的通过酵母双杂交试验筛选与HIV Tat蛋白相互作用的宿主因子。方法对构建的pGBKT7-tat进行自激活和半乳糖苷试验。运用酵母双杂交实验以HIV Tat作为诱饵,与人均一化基因库进行初筛。对筛选出来的阳性克隆进行测序分析。结果构建的pGBKT7-tat无自激活特性和细胞毒性,然后进行酵母双杂交试验。结果发现在DDO/X/A平板上出现47个阳性的蓝色斑点,在QDO/X/A平板上进行进一步筛选,对再次出现的8个蓝色斑点进行测序。在GenBank中对相互作用的人体基因进行BLAST分析,根据基因注释推测其在病毒与机体相互作用过程中可能发挥的作用。结果测出5个不同的基因,这5个不同的基因分别为羧肽酶N、酪氨酸磷酸酶受体M、ATP1B1、锌指蛋白MYM2和锌指蛋白MYM5。结论本研究新筛选出羧肽酶、酪氨酸磷酸酶受体和ATP1B1病程相关蛋白及两个锌指蛋白等5种功能蛋白与HIV Tat相互作用,为进一步研究HIV Tat蛋白功能提供依据。
基金:
国家科技重大专项项目(2012 ZX10004207-004)
基金编号:
2012 ZX10004207-004
第一作者:
第一作者单位:
[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
路艳芳,刘为勇,乔龙,等.用酵母双杂交筛选与HIV Tat相互作用的宿主因子[J].华中科技大学学报(医学版).2016,45(04):398-401.