目的了解2005-2014年中国主要地区儿童患者中革兰阴性分离菌对常用抗菌药物的耐药性。方法中国主要地区19所教学医院（17所综合医院和2所儿童医院）分离自儿童患者的革兰阴性菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药物敏感试验。按CLSI 2014版标准判断结果。结果2005-2014年收集各医院儿童患者革兰阴性菌63 294株,其中肠杆菌科细菌43 109株,占68.1%,不发酵糖革兰阴性杆菌13 994株,占22.1%。儿童患者分离革兰阴性菌的检出率呈下降趋势:2006年为14.4%,2014年为12.1%。肠杆菌科细菌对头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢他啶及头孢吡肟平均耐药率较高,对碳青霉烯类、氨基糖苷类和酶抑制剂复合制剂平均耐药率均(10%。大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）平均产ESBL率分别为68.4%和62.2%。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素、两种酶抑制剂复合制剂及头孢菌素类耐药率明显上升。变形杆菌属、枸橼酸杆菌属及沙雷菌属对碳青霉烯类耐药率有下降趋势。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药率也呈上升趋势。铜绿假单胞菌对所测试的抗菌药物耐药率有下降趋势。嗜麦芽窄食单胞菌及伯克霍尔德菌属检出率不断增多但对所测试抗菌药物的耐药率变化不大。流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药率及产β内酰胺酶率均在30%45%。2014年碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌检出率为15.9%。2005-2014年均有广泛耐药（XDR）菌检出,XDR铜绿假单胞菌检出率在0.2%2.0%;XDR鲍曼不动杆菌和XDR肺炎克雷伯菌检出率分别在0.9%24.6%和04.2%。结论分离于儿童患者革兰阴性菌的耐药性总体呈上升趋势,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌和XDR的检出率不断增多是抗感染治疗的一大挑战,应引起临床关注。