目的 探讨褪黑素联合吉西他滨对胰腺癌细胞株PANC-1化疗敏感性的作用及其潜在的作用机制。方法 单独使用吉西他滨和联合褪黑素处理人胰腺癌细胞株PANC-1，CCK-8检测细胞活力；克隆形成实验观察褪黑素和吉西他滨单独或联合处理对PANC-1细胞克隆形成能力的影响；采用划痕实验和transwell实验检测细胞迁移能力；细胞活性氧ROS和线粒体膜点位JC-1检测试剂盒测定活性氧的合成和膜电位水平；亚铁离子荧光探针检测细胞内Fe2+水平；通过免疫荧光和Western-blot检测不同处理组中LC3、P62、GPX4和SLC7A11的蛋白表达水平。结果 CCK-8结果显示，吉西他滨单独处理48 h及72h后PANC-1细胞活力受到抑制，呈时间剂量依赖性，吉西他滨联合褪黑素组的细胞活力显著低于吉西他滨组，且细胞活力随着褪黑素的浓度升高而下降；细胞划痕、transwell及平板克隆实验结果显示，吉西他滨联合褪黑素组较吉西他滨组相比，细胞的增殖及迁移能力明显受到抑制；通过荧光显微镜观察并分析得出吉西他滨联合褪黑素组的PANC-1活性氧、Fe2+水平较吉西他滨组上升，线粒体膜电位显著下降（P＜0.01）；Westernblotting及免疫荧光结果显示，吉西他滨联合褪黑素组较吉西他滨组的自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I比值降低、P62表达上调，抗铁死亡相关蛋白GPX4及SLC7A11的表达受到显著抑制（P＜0.05），提示褪黑素联合吉西他滨可抑制PANC-1细胞自噬以及促进铁死亡。结论 褪黑素增加胰腺癌细胞PANC-1对吉西他滨的化疗敏感性，其作用机制可能是通过抑制细胞自噬及促进肿瘤细胞铁死亡。