目的 了解中国学龄前儿童血清叶酸水平、叶酸缺乏情况，并与WHO及美国疾控中心（CDC）提供的血清叶酸参考值范围进行比较，为中国学龄前儿童血清叶酸参考值的制定提供依据及意见。方法 2018年5月—2019年12月跨越中国东南西北中5个地区的13个城市招募儿童，最终获得1 373例小于7岁儿童样本，采用全自动化学发光免疫分析法（Mindray, CL-1000i, China）定量测定血清叶酸水平。结果 总体血清叶酸水平为12.46（10.08～15.35）ng/mL,参考区间(P5～P95)为6.89～21.00ng/mL,将CDC血清叶酸＜2ng/mL、WHO血清叶酸＜4ng/mL及本研究血清叶酸P5所对应血清叶酸值6.89ng/mL分别作为血清叶酸缺乏临界值，本人群叶酸缺乏人数分别为0人、3人（0.22%）、66人（4.81%）;不同年龄组间血清叶酸水平比较差异有统计学意义（F=1.244,P＜0.05）。血清叶酸与年龄呈负相关（β=-0.998）,与WAZ、HAZ、BMIZ无相关关系。各年龄组不同性别血清叶酸水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 单个界值点判断血清叶酸缺乏不适用于学龄前儿童，其血清叶酸参考值需要按照年龄制定。