目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）法测定小鼠血清和不同组织中多种胆汁酸（BAs）的浓度,对比体外培育牛黄（CBS）和天然牛黄（CB）对小鼠体内胆汁酸代谢轮廓（MPBA）的影响。方法小鼠分别灌胃给予CBS和天然CB,给药后收集不同时间点的全血、心、脾、肺、肾和脑组织,全血分离血清,用蛋白沉淀法处理血清和各组织。采用Diamonsil C18色谱柱（150 mm×2.1 mm, 5μm）分离胆汁酸,比较两种药物在动物血清和上述组织中相应胆汁酸的经时变化特征。结果 CBS组和天然CB组血清中胆酸（CA）、去氧胆酸（DCA）、牛磺胆酸（TCA）、鹅去氧胆酸（CDCA）、牛磺脱氧胆酸（TDCA）以及牛磺酸（Tau）的浓度-时间曲线下面积具有显著性差异（P(0.05）。BAs和Tau在CBS组和天然CB组中总体上浓度变化趋势相似,但CA和TDCA在不同组织中存在明显差异。结论 CBS和天然CB对体内血清和组织的胆汁酸代谢轮廓有不同的影响。CB类药材成分复杂,研究为其物质基础的深入研究提供了思路。