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脂多糖诱导高迁移率族蛋白B1在人牙髓细胞中转位的研究

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收录情况: ◇ 统计源期刊

单位: [1]同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心 [2]同济大学医学院附属上海市第十人民医学院口腔科 [3]安徽理工大学医学院 [4]华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心
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关键词: 脂多糖 人牙髓细胞 HMGB1 转位

摘要:
目的:观察低浓度脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导人牙髓细胞(human dental pulp cells, hDPCs)中高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)在细胞中的转位及其hDPCs细胞活性的影响。方法:采用原代组织块培养法,培养人牙髓细胞,取第3~6代细胞用于实验。分别用含不同质量浓度(0、10、50、100、500、1 000 ng/mL)LPS的培养液培养hDPCs 3 d,采用CCK-8法检测细胞活性;100 ng/mL LPS刺激hDPCs后,免疫荧光检测0 h、6 h、12 h及24 h HMGB1在hDPCs中的表达定位,RT-PCR检测各时间点hDPCs细胞TNF-α,IL-1及HMGB1的mRNA表达,ELISA试剂盒分析细胞上清中HMGB1的含量。结果:低浓度LPS刺激hDPCs后,细胞活性并无明显改变,提示hDPCs具有抵抗低浓度LPS的能力。RT-PCR结果示LPS浓度在10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL时,IL-1和HMGB1的mRNA水平无显著变化;500 ng/mL和1 000 ng/mL时,TNF-α、IL-1和HMGB1的mRNA水平显著上调。免疫荧光示LPS诱导后,在6 h、12 h及24 h均可见hDPCs细胞浆中HMGB1的表达,ELISA结果示HMGB1能分泌到细胞上清中。结论:低浓度LPS可对hDPCs活性基本无影响,且可诱导HMGB1在hDPCs中从细胞核转位到细胞浆,并释放到细胞外。

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第一作者:
第一作者单位: [1]同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院儿童口腔医学教研室上海牙组织修复与再生工程技术研究中心
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