摘要：
目的 观察内皮素-1(ET-1)对人小梁网细胞(TMCs)细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(COL I)的影响.方法 取死亡24h内尸眼小梁网组织,行TMCs原代和传代培养,并用FN、层黏连蛋白(LN)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和Ⅷ因子相关抗原(FⅧRAg)鉴定为人TMCs后,取传3代的人TMCs,给予不同浓度ET-1(10-9 、10-8、10-7 mol/L)孵育72h后,免疫荧光和Western blot观察ET-1对TMCs中FN、COL I表达的影响;然后取传3代的人TMCs,分别给予10-7mol/L ET-1、10-7mol/L ET-1+10-7 mol/L ETA受体拮抗剂、10-7mol/L ET-1+10-7 mol/L ETB受体拮抗剂后孵育72h,Western blot观察ET受体拮抗剂对FN、COL I表达的影响.结果 研究受到伦理委员会的批准,取材前征得供体家属的知情同意.培养的细胞形态多样,含少许色素颗粒,FN、LN、NSE染色均呈阳性反应,FⅧRAg呈阴性反应.人TMCs与10-9～10-7mol/L ET-1共孵育后FN表达上调(F=18.41,P＜0.05);与10-8mol/L、10-7mol/L ET-1共孵育后COL I表达上调(F=39.81,P＜0.05),并呈浓度依赖性,10-7mol/L时作用最明显;给予ETA受体拮抗剂后,与ET-1组相比,FN、COL I的表达均降低(qFN=7.213,P＜0.05;qCOLI=6.187,P＜0.05),但给予ETB受体拮抗剂后,FN、COL I的表达均无明显变化.结论 ET-1能够促进体外培养的人TMCs中FN、COL I的表达,其机制可能是通过激动ETA受体而非ETB受体发挥作用的.
