目的观察比较机械分离法和酶消化法分离纯化孕鼠胚胎来源肝干细胞的优劣。方法取孕13.5 d SD大鼠胚胎肝后分别用机械分离法和酶消化法分离纯化肝干细胞,比较两种方法所得细胞总量和存活率的差异,用免疫荧光染色法鉴定细胞,并比较原代培养前后肝干细胞存活率的变化。结果两种方法分离培养出的细胞形似卵圆形,经免疫荧光染色法检测表达干细胞标志物CD34和胆管细胞标志物CK19,机械分离法分离的肝干细胞数量(57.49±14.25)×10~6与酶消化法(63.36±12.67)×10~6相当,两者比较差异无统计学意义(P)0.05),但机械分离法所得肝干细胞的存活率(96.37±0.82)%高于酶消化法(93.53±0.63)%(P(0.05),并且培养前后细胞存活率也明显高于酶消化法,两两比较差异有统计学意义(P(0.05)。结论机械分离法是一种简单、经济、实用的胚胎来源肝干细胞分离纯化方法。