摘要:
目的探讨fibulin-5表达在膀胱尿路上皮癌中的影响作用。方法经尿道切除获取膀胱尿路上皮癌标本20例,其中低级别(G1和G2)13例、高级别(G3)7例。蛋白质印迹法检测fibulin-5在膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜组织中的表达。将PCR扩增的fibulin-5 cDNA克隆到pMD-19T载体中,构建p-EGFP-fibulin-5质粒。脂质体介导法将p-EGFF-fibulin-5质粒转染到人膀胱癌5637细胞株内,流式细胞仪分选,经G418筛选形成稳定的表达克隆。Boyden小室法检测未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞迁移和侵袭能力。结果正常膀胱黏膜、低级别和高级别膀胱尿路上皮癌组织中fibulin-5蛋白相对表达量分别为1.16±0.28、0.57±0.32和0.44±0.42。与正常膀胱黏膜相比,膀胱癌组织中fibulin-5蛋白表达显著下调(P(0.01),低级别和高级别癌之间差异无统计学意义(P)0.05)。转染成功的膀胱癌5637细胞显示绿色荧光。未转染、转染空载体和转染fibulin-5的膀胱癌细胞的迁移细胞数分别为136.9±5.7、139.3±7.7和127.6±3.1,侵袭细胞数分别为31.7±4.7、31.5±4.8和8.0±3.1。转染fibulin-5后膀胱癌细胞侵袭力明显降低(P(0.01),其迁移力虽低于对照组但差异无统计学意义(P)0.05)。结论 Fibulin-5蛋白表达减少可能是膀胱癌发生和发展的机制之一,过表达fibulin-5可以抑制膀胱癌细胞侵袭力。